細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是細(xì)胞學(xué)研究的基礎(chǔ),需要合適的培養(yǎng)體系,為細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖、發(fā)揮功能提供營(yíng)養(yǎng)。培養(yǎng)體系中往往需要添加胎牛血清,來(lái)為細(xì)胞培養(yǎng)提供生長(zhǎng)因子、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量≤3EU/ml,通過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)。
哺乳動(dòng)物的精子使卵母細(xì)胞受精后,全能性受精卵經(jīng)歷三到四輪細(xì)胞分裂,隨后在八細(xì)胞階段變得緊實(shí)。然后形成桑葚胚,桑葚胚分化為囊胚,囊胚包含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)和外層滋養(yǎng)外胚層(TE)細(xì)胞。這些過(guò)程依賴于母體RNA和蛋白質(zhì)的降解和再合成、表觀遺傳重編程和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)組織。這種動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)變與代謝重編程有關(guān),在這種狀態(tài)下,卵裂期早期的胚胎處于靜止?fàn)顟B(tài),需要丙酮酸和乳酸,然后過(guò)渡到高度氧化狀態(tài),需要葡萄糖來(lái)支持囊胚發(fā)育7。重要的是,代謝物在發(fā)育和細(xì)胞命運(yùn)決定中起著關(guān)鍵作用,如丙酮酸,它是合子基因組激活所必需的,葡萄糖,它區(qū)分TE和ICM細(xì)胞的細(xì)胞命運(yùn)。早期胚胎的代謝組學(xué)分析表明,l -2-羥戊二酸是卵母細(xì)胞中高度豐富的代謝物,其缺失促進(jìn)了受精后組蛋白標(biāo)記的消除。然而,脂質(zhì)代謝及其對(duì)哺乳動(dòng)物著床前胚胎發(fā)育的影響卻很少受到關(guān)注。
脂質(zhì)在能量產(chǎn)生、分化、增殖和信號(hào)傳遞中起著重要作用。先前的研究表明,脂質(zhì)重塑發(fā)生在諸如黑腹果蠅等無(wú)脊椎動(dòng)物的發(fā)育過(guò)程中。對(duì)卵磷脂營(yíng)養(yǎng)生物斑馬魚(yú)的研究揭示了胚胎發(fā)生過(guò)程中卵黃和機(jī)體中脂類的動(dòng)態(tài)組成。以往對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)源性脂肪酸和甘油三酯的研究表明,β -氧化在卵母細(xì)胞成熟和發(fā)育的能量代謝中起著至關(guān)重要的作用。對(duì)體外培養(yǎng)的牛胚胎的研究已經(jīng)揭示了哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)生過(guò)程中的脂類。然而,對(duì)小鼠和人類胚胎體內(nèi)各種類型的脂質(zhì)的全局圖像是缺失的。
成像技術(shù)已被用于觀察脂質(zhì),這使我們能夠可視化脂滴(LD)的分布,并研究LD的大小、合成和維持在小鼠胚胎發(fā)育中的重要性。此外,培養(yǎng)基中外源脂肪酸的供應(yīng)會(huì)影響多種物種的卵母細(xì)胞成熟、低溫保存、氧化應(yīng)激和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),飽和脂肪酸的補(bǔ)充會(huì)導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)應(yīng)激。這些結(jié)果突出了脂質(zhì)在卵母細(xì)胞和早期胚胎發(fā)育過(guò)程中的重要和復(fù)雜作用。但是,脂質(zhì)重塑的完整圖景以及它通過(guò)什么機(jī)制在著床前和著床期間促進(jìn)胚胎的生理發(fā)育仍然是難以捉摸的。
因此,科研人員試圖提供一個(gè)全面的脂質(zhì)重塑景觀,使用系統(tǒng)的脂質(zhì)組學(xué)方法來(lái)分析哺乳動(dòng)物著床前胚胎發(fā)育。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)以前被忽視的代謝調(diào)節(jié)途徑,在小鼠早期胚胎發(fā)育和培養(yǎng)囊胚形成過(guò)程中,脂質(zhì)不飽和程度、膜流動(dòng)性和頂基極性的建立。
相關(guān)研究發(fā)表在《Nature Cell Biology》上,文章標(biāo)題為:“Low input lipidomics reveals lipid metabolism remodeling during early mammalian embryo development"。