在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中,胎牛血清是一種極為重要的培養(yǎng)基成分,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。然而,胎牛血清的儲(chǔ)存和使用條件對(duì)其質(zhì)量有著至關(guān)重要的影響。本文將探討為什么解凍后的胎牛血清不宜在2-8℃存放過久,并介紹正確的儲(chǔ)存和使用方法。
胎牛血清的儲(chǔ)存條件
未拆封的胎牛血清應(yīng)儲(chǔ)存在-10℃至-20℃的溫度下,這是為了長期保持其穩(wěn)定性和質(zhì)量。在這一溫度范圍內(nèi),血清中的各種蛋白和脂蛋白能夠保持其天然狀態(tài),避免發(fā)生變性或沉淀。如果儲(chǔ)存溫度過高,血清中的蛋白質(zhì)容易變性,而溫度過低(如-80℃)則可能導(dǎo)致瓶子破裂,從而污染血清。
解凍過程中的注意事項(xiàng)
解凍胎牛血清時(shí),應(yīng)該遵循逐步解凍的原則。首先,將血清從冷凍箱中取出,置于2-8℃冰箱中融解,然后在室溫下使其融化。在整個(gè)解凍過程中,必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,以確保血清的溫度和成分均勻一致,減少沉淀的發(fā)生。
2-8℃存放過久的后果
雖然2-8℃是許多生物樣本的常規(guī)儲(chǔ)存溫度,但對(duì)于解凍后的胎牛血清來說,這一溫度并不適宜長期存放。實(shí)驗(yàn)表明,長時(shí)間在2-8℃儲(chǔ)存的血清,其中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能會(huì)聚集而形成沉淀或可見的混濁。這些沉淀物不僅影響血清的透明度,還可能影響其在細(xì)胞培養(yǎng)中的效果。
此外,血清中的一些營養(yǎng)成分在解凍后就開始降解,如果長時(shí)間在2-8℃存放,這些營養(yǎng)成分的降解速度會(huì)加快,進(jìn)一步影響血清的質(zhì)量。因此,解凍后的胎牛血清應(yīng)該盡快使用,避免在2-8℃存放過久。
正確的使用建議
為了確保胎牛血清的質(zhì)量和效果,建議按照以下步驟使用:
解凍:按照逐步解凍法,將血清從-20℃或更低溫度取出,先在2-8℃冰箱中融解,然后在室溫下使其融化,并規(guī)則地?fù)u晃均勻。
分裝:如果一次無法用完一瓶血清,建議無菌分裝至恰當(dāng)大小的滅菌容器內(nèi),再放回-20℃冷凍保存。這樣可以有效避免反復(fù)凍融對(duì)血清質(zhì)量的影響。
使用:配制完培養(yǎng)基后,應(yīng)盡快使用。已經(jīng)配制了血清及抗生素的新鮮培養(yǎng)液,最好在兩周內(nèi)用完,以避免營養(yǎng)成分的降解。
解凍后的胎牛血清不宜在2-8℃存放過久,因?yàn)殚L時(shí)間在這一溫度下儲(chǔ)存會(huì)導(dǎo)致血清中的蛋白和脂蛋白聚集形成沉淀,同時(shí)加速營養(yǎng)成分的降解。為了確保血清的質(zhì)量和效果,應(yīng)該遵循正確的儲(chǔ)存和使用方法,包括逐步解凍、無菌分裝和盡快使用。只有這樣,才能保障細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。