細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染是一種常見的問題,它會導(dǎo)致細(xì)胞生長和增殖受到抑制,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以下是可能出現(xiàn)的問題:
細(xì)胞生長緩慢或停滯不前:支原體會占據(jù)細(xì)胞內(nèi)的營養(yǎng)源并抑制其他微生物的生長,從而導(dǎo)致細(xì)胞缺乏足夠的營養(yǎng)供應(yīng),生長速度變慢或停滯不前。
細(xì)胞形態(tài)異常:支原體感染會導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,如細(xì)胞變得不規(guī)則、腫脹、變形等。
細(xì)胞凋亡增加:支原體感染會釋放一些有害物質(zhì),這些物質(zhì)會干擾細(xì)胞的正常功能,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡增加。
細(xì)胞代謝異常:支原體感染會影響細(xì)胞的代謝過程,導(dǎo)致代謝產(chǎn)物積累和能量消耗增加,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
細(xì)胞產(chǎn)生異常蛋白質(zhì):支原體感染會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成受到影響,從而產(chǎn)生異常蛋白質(zhì),這可能會影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
細(xì)胞產(chǎn)生抗生素耐藥性:支原體感染會使細(xì)胞產(chǎn)生抗生素耐藥性,這意味著在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中需要使用更高劑量的抗生素才能達(dá)到相同的效果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可信:由于支原體污染會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,因此如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果受到了支原體污染的影響,那么這些結(jié)果就不具備科學(xué)價值。
傳染風(fēng)險:如果細(xì)胞培養(yǎng)液被支原體污染,那么這些污染物可能會傳播到其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備或人員身上,從而增加傳染風(fēng)險。
支原體是一種常見的細(xì)胞內(nèi)寄生菌,它會對細(xì)胞的生長和增殖產(chǎn)生負(fù)面影響。如果您的細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染了,可以采用以下方法清除支原體:
對于非重要的細(xì)胞,如培養(yǎng)中的細(xì)胞、WCB的細(xì)胞等,將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。
對于較為重要的細(xì)胞,如來源珍貴或?qū)嶒?yàn)室中細(xì)胞保藏量較小等可以采用以下(2)-(8)的方法:
用清洗純化法清除支原體污染的方法:細(xì)胞營養(yǎng)馴化→優(yōu)質(zhì)細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌,其原理是利用離心力、細(xì)胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。
用抗生素清除支原體污染的方法:根據(jù)抗生素敏感譜選擇合適的抗生素,加入含有抗生素的培養(yǎng)基中,使抗生素濃度達(dá)到抑制或殺死支原體的水平。
用抗代謝產(chǎn)物清除支原體污染的方法:加入含有抗代謝產(chǎn)物的培養(yǎng)基中,使抗代謝產(chǎn)物濃度達(dá)到抑制或殺死支原體的水平。
用基因工程技術(shù)清除支原體污染的方法:通過基因工程技術(shù)構(gòu)建具有抗支原體活性的工程菌株,并將其導(dǎo)入到宿主細(xì)胞中。
用物理方法清除支原體污染的方法:如超濾、反滲透、離子交換等。